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2023, Nature Biomedical Engineering. DOI: 10.1038/s41551-023-01114-1
Detection of cellular traction forces via the force-triggered Cas12a-mediated catalytic cleavage of a fluorogenic reporter strand
Yuxin Duan, Fania Szlam, Yuesong Hu, Wenchun Chen, Renhao Li, Yonggang Ke, Roman Sniecinski, Khalid Salaita
Abstract:
No abstract available.
2023-11-30 23:40:00
#paper doi:doi.org/10.1038/s41551-023-01114-1 Detection of cellular traction forces via the force-triggered Cas12a-mediated catalytic cleavage of a fluorogenic reporter strand 本文介绍了利用CRISPR相关蛋白(Cas)-Cas12a 检测活细胞表面受体分子力事件的方法,其技术路径:激活剂是固定在表面(如玻璃载玻片)上的ssDNA,激活剂通过与互补链杂交而被隐藏,互补链又与配体肽结合;当细胞被植入该表面时,表面受体和配体结合,并施加力,超过双链的机械耐受性的力会导致其断裂,暴露激活剂;激活Cas12a会高效地催化切割荧光性ssDNA报告基因。在作为测试的血小板力检测中,其具有以下优势1.活细胞2.只需要~5 μl或更少的血液来进行每次测量,降低了高通量筛选的难度3.检测结果与出血风险更高的相关4.更短的时间(30min),更易识别的信号,可能更低的成本。对 CRISPR 检测不太了解,欢迎斧正。
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